ประเทศไทยอยู่ในเขตภูมิอากาศร้อนชื้น มีสภาวะเหมาะสมให้เกิดการปนเปื้อนของเชื้อราที่สามารถผลิตสารพิษได้ โดยเฉพาะผลผลิตทางการเกษตร ซึ่งใช้เป็นวัตถุดิบนำมาประกอบเป็นอาหารสัตว์ เช่น ข้าวโพด ข้าวฟ่าง ถั่วลิสง ถั่วเหลือง ปลาป่น เป็นต้น มักมีอะฟลาทอกซินปนเปื้อนมาด้วยเสมอ (ศรีสิทธิ์, 2525; วิรัช และคณะ, 2525) เมื่อสัตว์ได้รับสารพิษดังกล่าวจากเชื้อราผ่านมาทางอาหารและเข้าสู่ร่างกาย สารพิษจะทำอันตรายโดยบั่นทอนสุขภาพและผลผลิต และถ้าได้รับในปริมาณสูงมีอันตรายถึงแก่ชีวิตได้ ดังนั้นการตรวจวิเคราะห์อะฟลาทอกซิน จึงสามารถลดอัตราการสูญเสียเศรษฐกิจ และเพิ่มคุณภาพผลผลิตได้ การวิเคราะห์หาอะฟลาทอกซินในอาหารและวัตถุดิบอาหารสัตว์ ได้แก่ วิธีทางเคมี เช่น Thin Layer Chromatography (TLC), High Performance Liquid Chromatography (HPLC) และ วิธีทางอิมมูโน เช่น Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)
    วิธี Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ซึ่งเป็นวิธี screening test เป็นอีกวิธีหนึ่งที่ใช้ในการตรวจสอบอะฟลาทอกซิน และเป็นที่ยอมรับตามมาตรฐานการวิเคราะห์ของ AOAC ผู้ผลิตอาหารสัตว์นิยมใช้ชุดตรวจสอบอะฟลาทอกซินในวัตถุดิบจากต่างประเทศ ซึ่งวิธีนี้ใช้ง่ายแต่มีราคาแพง หากลดการนำเข้าชุดทดสอบเหล่านี้และใช้ชุดทดสอบที่พัฒนาและผลิตขึ้นภายในประเทศแทนจะช่วยลดดุลการค้าของไทยได้มากขึ้น วิธีนี้ยังพัฒนาเพื่อใช้ทดสอบอาหาร เช่น ถั่วลิสง พริก และ ข้าวกล้อง

วิธีการสกัดอะฟลาทอกซิน
    นำตัวอย่างจำนวน 20 กรัม เติมสารละลายเมธานอล 70 % ปริมาตร 100 มิลลิลิตร เขย่าด้วยเครื่องเขย่า ความเร็วรอบ 300 รอบต่อนาที เป็นเวลา 30 นาที กรองด้วยกระดาษกรองเบอร์ 4 เก็บส่วนใสและเจือจางด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ชนิด PBS-T อัตราส่วน 1: 10 หลังจากนั้นนำไปวิเคราะห์หาอะฟลาทอกซินด้วยวิธี KU-AF01

การวิเคราะห์อะฟลาทอกซิน
    KU-AF01 เป็นวิธีวิเคราะห์อะฟลาทอกซินแบบว่องไวภายใน 25 นาที ที่อุณหภูมิห้อง โดยใช้โพลีโคล-นอลแอนติบอดีที่ผลิตขึ้นภายในห้องปฏิบัติการตามวิธีการของ Chu และ Ueno (1977) และ ประวัติและคณะ(2534) โดยวิธี KU-AF01 ใช้แอนติเจนเคลือบ solid phase เติมแอนติบอดีที่ติดฉลากด้วย Horseradish peroxidase ลงไปในปริมาณจำกัดคงที่และเติมแอนติเจนหรือสิ่งส่งตรวจลงไปพร้อมกัน ทำให้เกิดการแข่งขันระหว่างแอนติเจนที่เคลือบกับแอนติเจนที่เติมลงไป แอนติบอดีจะจับกับแอนติเจนบน solid phase ล้างส่วนที่ไม่ได้ทำปฏิกิริยาออก เมื่อเติมซับสเตรทลงไป การเปลี่ยนแปลงของสีจะเป็นสัดส่วนกลับกับปริมาณของแอนติเจนในสิ่งส่งตรวจหรือแอนติเจนมาตรฐานที่ได้เติมลงไป วัดค่าการดูดกลืนคลื่นแสงที่ 450 นาโนเมตร

การทดสอบความใช้ได้ของวิธี KU-AF01
    นำตัวอย่างถั่วลิสงวิเคราะห์ความใช้ได้ของวิธีที่อุณหภูมิห้องปฏิบัติการ (25±2 ^oC) ได้ค่า r² = 0.93, 20 กรัม% recovery เท่ากับ 70 จากขั้นตอนการ spike ปริมาณอะฟลาทอกซินเข้มข้น 10 ppb ในตัวอย่างข้าวกล้องจำนวน จากการทดลองเติมสารมาตรฐานที่ความเข้มข้น 10 , 20 และ 50 ppb ลงในสารละลายที่สกัดจากตัวอย่าง สามารถวัดค่าอะฟลาทอกซินกลับคืนได้ 10±1.1, 20±1.2 และ 50±7.2 ppb ตามลำดับ(Table 1) โดยมีค่า limitation of Detection ของวิธีการ KU-AF01 เท่ากับ 4 ppb